Protein-Konzentrationsrechner

Kategorie: Biologie
- März 23, 2025
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Typische Werte liegen zwischen 0.5 und 2.0
Standardküvetten haben eine Weglänge von 1 cm
Falls die Probe vor der Messung verdünnt wurde (z. B. 5 = 1:5 Verdünnung)

Die Konzentration von Protein unter Verwendung der Absorbanz bei 280 nm (A280) wird unter Verwendung des Beer-Lambert-Gesetzes bestimmt:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

wobei:

  • \( C \) = Protein Konzentration (mg/mL)
  • \( A \) = Absorbanz bei 280 nm
  • \( \epsilon \) = Extinktionskoeffizient (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Weglänge der Küvette (cm)

Was ist der Protein Konzentrationsrechner?

Der Protein Konzentrationsrechner hilft, die Protein Konzentration mit verschiedenen Methoden zu bestimmen, einschließlich:

  • Absorbanz bei 280 nm (A280): Eine schnelle und nicht-invasive Methode, die auf aromatischen Aminosäuren basiert.
  • Bradford-Test: Eine kolorimetrische Methode, die auf Farbstoffbindung basiert.
  • BCA (Bicinchoninsäure) Test: Eine Methode, die auf Kupferreduktion und kolorimetrischer Detektion beruht.
  • Lowry-Test: Ein gut etablierter Ansatz, der Protein-Kupfer-Interaktionen nutzt.

Wie man den Rechner benutzt

Befolgen Sie diese Schritte, um die Protein Konzentration zu berechnen:

  • Wählen Sie die Messmethode (A280, Bradford, BCA oder Lowry).
  • Geben Sie die erforderlichen Werte wie Absorbanz, Verdünnungsfaktor und Extinktionskoeffizienten (falls erforderlich) ein.
  • Wenn Sie eine Standardkurvenmethode verwenden (Bradford, BCA oder Lowry), geben Sie die Kurvenparameter ein.
  • Klicken Sie auf die Schaltfläche "Berechnen", um das Konzentrationsergebnis zu erhalten.

Vorteile der Verwendung des Rechners

  • Spart Zeit durch Automatisierung der Konzentrationsberechnungen.
  • Unterstützt mehrere Messmethoden für Flexibilität.
  • Beinhaltet einen Verdünnungsrechner zur Vorbereitung spezifischer Konzentrationen.
  • Reduziert menschliche Fehler bei manuellen Berechnungen.

Häufig gestellte Fragen

1. Wie genau ist die Absorbanz (A280) Methode?

Die A280-Methode ist im Allgemeinen genau für reine Proteine, kann jedoch durch Verunreinigungen wie Nukleinsäuren beeinflusst werden.

2. Kann ich den Bradford-Test für alle Proteine verwenden?

Der Bradford-Test funktioniert gut für die meisten Proteine, kann jedoch je nach Proteinzusammensetzung variable Ergebnisse liefern.

3. Was ist der Vorteil des BCA-Tests?

Die BCA-Methode ist besser mit Detergenzien kompatibel und hat einen breiteren linearen Bereich als Bradford.

4. Wie wähle ich den richtigen Extinktionskoeffizienten für A280 aus?

Verwenden Sie veröffentlichte Werte für bekannte Proteine oder berechnen Sie den Extinktionskoeffizienten basierend auf der Aminosäurezusammensetzung.

5. Warum benötige ich einen Verdünnungsfaktor?

Wenn Ihre Probe vor der Messung verdünnt wird, müssen Sie die berechnete Konzentration mit dem Verdünnungsfaktor multiplizieren, um die korrekte Endkonzentration zu erhalten.